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    細胞培養(yǎng)試劑這樣用 ,你都對了嗎?

    發(fā)布時間: 2021-11-02  點擊次數(shù): 1310次

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    為什么要在溶解的一周內(nèi)使用貯存在4℃冰箱中的液體胰蛋白酶溶液?

    答:胰蛋白酶在4℃就可能開始降解,如果在室溫下放置超過30分鐘,就會變得不穩(wěn)定,但是胰酶在消化細胞前必須要預(yù)熱,否則容易出現(xiàn)酶活力不夠, 也會導(dǎo)致細胞消化不下來,所以為了更好的培養(yǎng)細胞,在細胞培養(yǎng)不多的時候可以分裝使用,這樣就不會出現(xiàn)上面的兩種情況了,還有就是配制胰酶的時候一定要注意降低熱源哦。


    02

    培養(yǎng)細胞生長減慢的原因有哪些?其解決辦法有哪些?

    答:可能得原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷氨酰胺或生長因子等耗盡或缺乏或已被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液組分,比較新血清與舊血清支持細胞生長實驗找到可能的原因。 

    解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷氨酰胺或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在-5℃到-20℃;培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清*培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2 周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。

    03

    如何消除組織培養(yǎng)的污染?

    答:當重要的培養(yǎng)細胞污染時,研究者可能試圖消除或控制污染。首先,確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母,把污染細胞與其它細胞系隔離開,用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺,檢查HEPA過濾器。

    高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性,因而,做劑量反應(yīng)實驗確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素和抗霉菌素如時尤其重要。

    要是支原體污染,可以選擇我們的支原體抑制劑(啟達生物;貨號:SD0034)來抑制支原體的生長,它可使大部分的支原體清除干凈,也可少量頑固的支原體。黑膠蟲污染也使目前實驗室的一大問題,黑膠蟲清除劑對藥物的量和要求都很高,首先,使用的抗菌小分子純化度要高,這樣可降低產(chǎn)品本身存在的內(nèi)毒素,其次是加入的量,量少會清除不干凈黑膠蟲,但是量多會導(dǎo)致細胞的死亡,可以直接選擇我們的黑膠蟲抑制劑(啟達生物;貨號:SD0036) 1ml/支裝,每100ml只需100ul即可,關(guān)鍵是價格,優(yōu)惠到您不能想象 。



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